CN115927090A 审中 一种利用乳清制作的发酵剂及其应用
1.一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于,所述发酵剂的生产方法步骤如下所示:
S1:菌种选择:选择1株酵母菌及1株乳酸菌,其中酵母菌为库德里阿兹威毕赤酵母,乳酸菌为瑞士乳杆菌;
S2:菌种活化:将库德里阿兹威毕赤酵母放在30℃条件下的YPD液体培养基中,增殖培养至对数生长期,获得酵母菌发酵液,YPD液体培养基的成分为20g/L蛋白胨、20g/L葡萄糖、10g/L酵母浸粉;将瑞士乳杆菌放在37℃条件下的MRS液体培养基中,增殖培养至对数生长期,获得乳酸菌发酵液,MRS液体培养基的成分为10g/L蛋白胨、8g/L牛肉粉、4g/L酵母浸粉、20g/L葡萄糖、2g/L磷酸氢二钾、2g/L柠檬酸氢二铵、5g/L乙酸钠、0.2g/L硫酸镁、0.04g/L硫酸锰、1g/L吐温80;将酵母菌发酵液和乳酸菌发酵液离心后收集菌体沉淀,分别用无菌生理盐水重悬清洗菌体沉淀三次,加入发酵液原体积1/10的无菌生理盐水后获得酵母菌种子液和乳酸菌种子液;
S3:乳清接种和发酵:在乳清中接入5-15‰(v/v)酵母菌种子液和1-8‰乳酸菌种子液,通过搅拌设备混匀液体,接种后的乳清在可加热、恒温的罐体中发酵7-10天;
S4:制作发酵剂:发酵好的乳清通过喷雾干燥、冷冻干燥等方式制成干粉发酵剂。
2.根据权利要求1所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于:所述库德里阿兹威毕赤酵母Pichia kudriavzevii,其保藏名称为Pichia kudriavzevii AP4,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏地址是广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼,保藏日期:2021年3月26日,保藏编号:GDMCCNO.61583;
所述瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus,保藏名称为LactobacillushelveticusAP3,其保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏地址是广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼,保藏日期:2021年6月23日,保藏编号:GDMCC NO.61736。
3.根据权利要求2所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于:所述库德里阿兹威毕赤酵母、瑞士乳杆菌在发酵剂中活菌数达到108CFU/g、109CFU/g。
4.根据权利要求2所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于:所述库德里阿兹威毕赤酵母的ITS基因序列如SEQ ID NO:1所示。
5.根据权利要求2所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于:所述瑞士乳杆菌的16S rDNA基因序列如SEQ ID NO:2所示。
6.根据权利要求1所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于,所述S3中的搅拌设备包括搅拌斗(1)和混料箱(2),所述搅拌斗(1)的顶端与混料箱(2)的底端固接且连通,所述混料箱(2)的顶端固定连接有控制箱(3),所述控制箱(3)的内腔固定安装有电机(4),所述电机(4)的输出端与连接轴一固接,所述连接轴一上套接有锥齿轮一(5),所述锥齿轮一(5)与锥齿轮二(6)啮合连接,所述锥齿轮二(6)与转动杆(7)套接,所述转动杆(7)的顶端通过密封轴承与输气管转动连接,所述转动杆(7)的底端贯穿混料箱(2)延伸至搅拌斗(1)中与连接轴二固接,所述转动杆(7)上套接有螺旋搅拌扇叶(8),所述转动杆(7)上均匀设有多个喷孔(9),所述搅拌斗(1)内壁通过连接杆与密封箱(11)固接,所述密封箱(11)内设有传动组件,所述连接轴二通过传动组件与连接轴三连接,所述连接二上套接有搅拌件一(12),所述连接轴三上套接有搅拌件二(13),所述搅拌斗(1)的底端固接有出料管(17);所述搅拌斗(1)和混料箱(2)的内壁上均固接有加热丝(31);所述搅拌斗(1)的外侧壁上固接有温度感应器(32);所述搅拌斗(1)外侧壁上固接有含氧量检测器(33);所述混料箱(2)顶端设有气压调节模块(34),且气压调节模块(34)和混料箱(2)通过管道相互连通,管道上设有电磁阀。
7.根据权利要求6所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于,所述传动组件包括锥齿轮三(14)、锥齿轮四(15)和锥齿轮五(16),所述连接轴二的底端延伸至密封箱(11)中与锥齿轮三(14)套接,所述锥齿轮三(14)与锥齿轮四(15)啮合连接,所述锥齿轮四(15)与锥齿轮五(16)啮合连接,所述锥齿轮五(16)与连接轴三套接,所述锥齿轮四(15)与连接轴四套接,所述连接轴三和连接轴四均与密封箱(11)转动连接。
8.根据权利要求7所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于,所述搅拌斗(1)与混料箱(2)之间固定连接有滤网一(10),所述滤网一(10)的中心通过密封轴承与转动杆(7)转动连接,所述出料管(17)的底端套接有固定环一(19),所述固定环一(19)通过螺栓(27)与固定环二(20)固定连接,所述固定环二(20)中心固接有滤网二(18),所述滤网二(18)与出料管(17)相适应。
9.根据权利要求8所述的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于,所述固定环一(19)上呈环形阵列开设有多个弧形卡槽(26),所述弧形卡槽(26)的一端设有开口,所述固定环二(20)的顶部固接有多个固定套筒(21),所述固定套筒(21)的一侧固接有卡板(25),所述固定套筒(21)和卡板(25)均与弧形卡槽(26)滑动连接,所述螺栓(27)贯穿固定环二(20)和卡板(25)与固定环一(19)螺纹连接;所述固定套筒(21)的内腔固接有弹簧(22),所述弹簧(22)的另一端与T型件(23)固接,所述T型件(23)的另一端贯穿固定套筒(21)与顶板(24)固接,所述顶板(24)与弧形卡槽(26)的内壁顶端相贴合;所述弧形卡槽(26)背离开口的一侧内壁固接有磁块二(29),所述卡板(25)上固接有磁块一(28),所述磁块一(28)与磁块二(29)相贴合。
10.一种利用乳清制作的发酵剂的应用,该应用适用于上述的权利要求1-8中的一种利用乳清制作的发酵剂,其特征在于:该应用步骤如下所示;
S1:将洗净晾干的蔬菜、调味料放入发酵好的乳清或干粉发酵剂复溶的饮用水中;
S2:在温暖环境中发酵0.5-3天,得到快速发酵泡菜;
S3:对乳清发酵剂发酵泡菜中的总酸含量、pH值、亚硝酸盐含量、钙含量、质构和感官等指标进行检测。
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