本发明公开了一种桂牧一号象草小滴玻璃化法超低温保存的方法，属于植物遗传资源保护技术领域。所述超低温保存方法的步骤包括：(1)选取桂牧一号象草的腋芽，消毒，进行预培养；(2)将预培养后的腋芽切段，用含疏水纳米碳酸钙的玻璃化液与水按体积比4:1混合的混合液浸泡处理腋芽段；(3)浸泡处理后转移至含疏水纳米碳酸钙的玻璃化液液滴中，快速冷却，超低温保存；(4)恢复培养。本发明采用的桂牧一号象草小滴玻璃化法超低温保存方法成活率高，对桂牧一号象草的种质保存效果优异。