点击本文中加粗蓝色字体即可一键直达新药情报库免费查阅文章里提到的药物、机构、靶点、适应症的最新研发进展。
抗体-药物偶联物（ADCs）：分析测定药物-抗体比率（DAR）方法最新进展
引言
抗体-药物偶联物（ADCs）通过化学手段将高活性小分子药物（有效载荷）与特定亲和性的抗体结合而生成。这类生物制药因其能够将细胞毒素输送至肿瘤细胞及其微环境中，在肿瘤治疗上展现出巨大潜力。目前已有9种ADCs获美国食品药品监督管理局（FDA）批准，超过90种ADC正处于临床开发阶段（见表1）。然而，传统ADC合成方法导致的药物-抗体比率（DAR）和药物分布异质性问题成为研发挑战。
现状与挑战
尽管近年来ADC领域发展迅速，合成方法导致的异质性不仅影响药物质量，而且监管要求也对ADC的分析表征提出高标准。FDA和欧洲药品管理局已要求如同分析大分子药物和小分子药物一样严谨地分析ADC。然而，由于ADC结构复杂、多样和异质，这一目标仍面临巨大阻碍。针对DAR有效测定的理想分析方法至今尚未确立，成为生物分析化学家的一大挑战。
DAR测定的分析方法
目前用于测量ADC DAR的主要方法包括高效液相色谱（HPLC/UV）、液相色谱-四极杆/飞行时间质谱（LC-QTOF/MS）和紫外-可见光（UV-Vis）。
1. HPLC/UV方法
该方法通过检测偶联有效载荷引起的抗体或其片段亲水性的变化来计算平均DAR。该方法的优点在于操作简便、数据准确且可重复，但不能识别每种不同的DAR物种分子量。通常使用疏水作用色谱（HIC）和反相（RP）-HPLC来进行DAR测量。HIC在原生条件下对完整ADC进行分析，减少样品准备需求，是DAR测定的标准方法之一；RP-HPLC则更注重分离和分辨率。
2. LC-QTOF/MS方法
此方法通过结合HPLC与质谱系统，不仅能提供有效载荷分布，还能确定每种DAR物种的分子量，被视为理想的DAR测量方法。但对特别亲水的有效载荷效果欠佳，且对于某些较为敏感的抗体，变性条件下的分析可能导致降解问题。
3. UV-Vis方法
此技术基于吸光度和消光系数计算平均DAR，由于样品准备简单、操作方便，是一种快速的测定方法，但要求有效载荷具有显著的吸收差异，且无法获得混合物中各DAR物种的比例信息。
技术特点与进展
截至目前，各种方法在应用中仍存在一定局限性。HPLC/UV方法因其准确定量性和成熟性广受应用；LC-QTOF/MS方法则因其高分辨率优势被用于高难度分析，但需进一步优化提升其灵敏度；UV-Vis方法简单快捷，但在精准度和信息全面性上略显不足。
未来展望
随着ADC领域的进一步发展，特异性ADCs可能取代传统随机偶联的ADCs，成为新的研究热点。对于这些新型抗体-药物结合物，更为简便和高效的DAR测定方法将是重要的研究方向。近期，二维液相色谱（2D LC/MS）技术的出现为复杂结构ADC的分析提供了新的可能性，该技术结合两种不同色谱柱，提高了分析分辨率和效率。此外，进一步优化传统方法中的色谱条件和流动相组成，以克服现有方法的局限，将是未来的重要研究课题。
结语
本文综述了多种当前用于ADCs DAR测定的代表性分析技术，并总结了它们的优点和局限性。尽管这些技术方法已在ADCs表征中得到广泛应用，但随着新型ADCs结构和功能的不断涌现，进一步优化和创新分析方法是未来的关键方向。
免责声明：新药情报内容编辑团队专注于介绍全球生物医药健康研究的最新进展，本文旨在提供信息交流，不代表任何立场或治疗方案推荐。如需专业医疗建议，请咨询正规医疗机构。
