CN112023119B 有效 胶原基生物膜补片及其制备方法和应用
1.一种胶原基生物膜补片的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
将胶原蛋白和糖胺聚糖混合,制备复合液;
将所述复合液置于冻干模具中,先在0℃~10℃下进行预冷处理1h~2h,然后由-10℃~-40℃降温至-40℃~-50℃并在-40℃~-50℃下进行预冻处理1h~2h,所述冻干模具底部的厚度为0.5mm~5.0mm;及
将预冻处理后的所述复合液进行冷冻干燥,制备胶原基生物膜补片,所述冷冻干燥的步骤包括:先在-20℃~-60℃下抽真空10min~60min,再将温度升至-30℃~-10℃下进行一次干燥180min~600min,然后将温度升至4℃~10℃下进行二次干燥60min~240min,最后将温度升至10℃~30℃下进行三次干燥60min~240min。
2.根据权利要求1所述的胶原基生物膜补片的制备方法,其特征在于,所述预冷处理的温度为2℃~6℃。
3.根据权利要求1所述的胶原基生物膜补片的制备方法,其特征在于,所述由-10℃~-40℃降温至-40℃~-50℃的步骤中,降温速率为0.1℃/min~1.0℃/min。
4.根据权利要求1~3任一项所述的胶原基生物膜补片的制备方法,其特征在于,所述冷冻干燥的步骤中,真空度为0.2mbar~0.3mbar;及/或,
所述将温度升至-30℃~-10℃的升温时间为10min~60min;及/或,
所述将温度升至4℃~10℃的升温时间为20min~90min;及/或,
所述将温度升至10℃~30℃的升温时间为30min~240min;及/或,
所述抽真空的温度为-40℃~-50℃。
5.根据权利要求1所述的胶原基生物膜补片的制备方法,其特征在于,所述将胶原蛋白和糖胺聚糖混合的步骤包括:
将所述胶原蛋白分散在酸性试剂中制备胶原浆液,将所述糖胺聚糖溶解在酸性试剂中制备糖胺溶液;
将所述胶原浆液和所述糖胺溶液混合,制备复合液;
其中,所述胶原浆液的质量浓度为0.3%~1.0%;所述糖胺聚糖为硫酸软骨素,所述糖胺聚糖的加入量为所述胶原蛋白质量的2%~15%;及/或,
所述冷冻干燥的步骤之后,还包括将冷冻干燥后的复合膜进行交联的步骤,所述交联选自物理交联及化学交联中的至少一种;所述物理交联的温度为100℃~120℃,时间为10h~40h;所述化学交联采用甲醛蒸汽进行交联。
6.根据权利要求1所述的胶原基生物膜补片的制备方法,其特征在于,所述冷冻干燥的步骤之后,还包括灭菌的步骤,灭菌方式选自环氧乙烷灭菌、钴60辐照灭菌和电子束辐照灭菌中的一种。
7.根据权利要求6所述的胶原基生物膜补片的制备方法,其特征在于,所述环氧乙烷灭菌的工艺参数为:预真空度为-20kPa~-40kPa,环氧乙烷浓度为5kg~7kg,灭菌温度为45℃~55℃,灭菌湿度为30%~70%,环氧乙烷作用时间为300min~400min,换气真空度为-10kPa~-30kPa,换气次数为3次~5次,换气时间为20min~40min;所述钴60辐照灭菌和所述电子束辐照灭菌的剂量为15kGy~25kGy。
8.一种胶原基生物膜补片,其特征在于,由权利要求1~7任一项所述的胶原基生物膜补片的制备方法制备得到。
9.根据权利要求8所述的胶原基生物膜补片,其特征在于,所述胶原基生物膜补片的厚度为2mm~8mm,所述胶原基生物膜补片包括层叠设置的致密层和多孔层,所述致密层的厚度为10μm~50μm,所述致密层的孔径小于10μm或所述致密层为无孔结构,所述多孔层的孔径为10μm~300μm。
10.根据权利要求9所述的胶原基生物膜补片,其特征在于,所述多孔层的孔径为50μm~150μm。
11.根据权利要求9所述的胶原基生物膜补片,其特征在于,所述胶原基生物膜补片还包括表层,所述表层层叠在所述多孔层远离所述致密层的一侧;
所述表层包括由胶原纤维构成的网络结构,所述表层的孔径小于10μm,所述胶原纤维的直径为50nm~1000nm;或者,所述表层为含有孔洞的胶原膜,在所述表层中,每50μm×50μm的区域,存在1个~50个孔洞。
12.根据权利要求11所述的胶原基生物膜补片,其特征在于,所述表层的厚度为5μm~20μm。
13.根据权利要求8~12任一项所述的胶原基生物膜补片,其特征在于,所述胶原基生物膜补片的孔隙率大于90%。
14.由权利要求8~13任一项所述的胶原基生物膜补片在制备硬脑膜或硬脊膜的修复材料中的应用。
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