CN115918543A 审中 一种砂生槐无菌苗扩繁方法
1.一种砂生槐无菌苗扩繁方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1,砂生槐初代培养,所述初代培养包括砂生槐种子的消毒、砂生槐种子的萌发和砂生槐幼苗的获得;
所述砂生槐种子萌发时,使用的胚芽诱导培养基配方为:WPM+6-BA 0.59-0.61 mg/L+IBA 0.49-0.51 mg/L+NAA 0.39-0.41 mg/L;或,WPM+6-BA 0.29-0.31 mg/L+IBA 0.59-0.61 mg/L+NAA 0.49-0.51 mg/L;
S2,砂生槐继代增殖培养;所述砂生槐继代增殖培养时,使用的继代增殖培养基的配方为:WPM+19-21 g·L -1 蔗糖+0.6-0.65 mg·L-1 6-BA+1.0-1.05 mg·L-1 GA3+0.5-0.56mg·L-1 IBA;
S3,砂生槐组培苗生根培养;所述砂生槐组培苗生根培养时,使用的生根培养基的配方为:MS+29-31 g·L-1 蔗糖+1.0 mg·L-1 GA3,或,WPM+19-21 g·L-1 蔗糖+0.5 mg·L-1 IBA,或,WPM+19-21 g·L-1 蔗糖+0.5 mg·L-1 IBA+0.5 g·L-1活性炭。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述砂生槐无菌苗的培养条件为:温度 26±2℃、光照强度为 4500 lx,光照时间为 8 h/d。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤S1中,所述砂生槐种子的消毒方法为:将催芽后的砂生槐用75%酒精处理110s-130s,无菌水清洗后,用10%次氯酸钠溶液消毒28-32min,然后再用无菌水清洗。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述砂生槐种子的催芽方法为:将砂生槐种子用96% 浓硫酸浸泡 30-40 min后,再用58-62℃的热水浸泡 12-13 h。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤S1中,培养所述砂生槐幼苗时,取带腋芽的顶芽或上部茎段进行扦插培养,优选取带腋芽的顶芽进行扦插培养,培养基为WPM+6-BA 0.59-0.61 mg/L+IBA 0.49-0.51 mg/L+NAA 0.39-0.41 mg/L。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:培养所述砂生槐幼苗时,取带腋芽的顶芽进行扦插培养。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤S2中,所述继代增殖培养基配方为:WPM+20 g·L -1 蔗糖+0.65 mg·L-1 6-BA+1.05 mg·L-1 GA3+0.56 mg·L-1 IBA。
8.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤S2中,所述继代培养的时间为20-30天,优选时间为30天,继代次数≤3次。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:步骤S2中,所述继代培养的时间为30天,继代2或3次。
10.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤S3中,所述砂生槐组培苗生根培养时,使用的生根培养基的配方为:WPM+20 g·L-1 蔗糖+0.5 mg·L-1 IBA+0.5 g·L-1活性炭。
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